Ikerketaren aurrekariak eta garrantzia
FMD txertoaren ekoizpenean, zelula-kulturako gainnadanteek zelula-hondakin kopuru handia dute. 0,2 μm-ko iragazketa esterilizatzaile baten menpe jartzen badira zuzenean, iragazki-mintzak azkar zikintzeko joera dute, eraginkortasuna murriztuz eta antigenoaren (146S birus-partikulak) iragazkortasunean eta errendimenduan eragina izan dezaketenak.
Ikerketa honek hiru galdera nagusitan jartzen du arreta:
Gainazaleko iragazketa eta sakoneko iragazketa errendimendua alderatzea, errendimenduari, uhertasun murrizketari eta beheragoko esterilizatzaile-iragazkien babesari dagokionez.
Zelulen hondakinak kentzeko sakonera-iragazki sendo eta positiboen abantaila paregabea egiaztatzea.
Industria-ekoizpenaren beharrei erantzuteko, uhertasun-maila desberdinak dituzten kultura-fluidoetara egokitutako iragazketa-eskema eskalagarriak ezartzea.
Oinarrizko esperimentuak eta emaitzak
Gainazaleko iragazketa vs. sakoneko iragazketa
Esperimentua:FMD txerto inaktibatuaren fluidoak 0,45 μm-ko polipropilenozko gainazaleko mintz bat eta sakonerako iragazki-orriak erabiliz iragazi ziren, eta ondoren 0,2 μm-ko esterilizatzeko iragazketa bat egin zen.
Aurkikuntzak:
Hasierako uhertasuna: 77 NTU.
Sakonerazko iragazketa:641 L/m²-ko emaitz; uhertasuna 9,65 NTU-ra murriztua (garbia eta distiratsua).
Gainazaleko iragazketa:46 L/m²-ko emaria baino ez; uhertasuna 41 NTU mantendu zen.
Beheko esterilizazio-iragazketa:Sakoneko iragazketa egin ondoren, 0,2 μm-ko iragazkiek 655 L/m²-ko iragazketa-errendimendua izan zuten, gainazaleko iragazketa egin ondoren 91 L/m²-rekin alderatuta; 7,2 aldiz hobekuntza.
146S-ren etekina:Sakonera handiagoa duen iragazketa gainazaleko iragazketa baino.
Ondorioa:Sakoneko iragazketa-errendimendua gainazaleko iragazketa baino 13,9 aldiz handiagoa izan zen, iragazkiaren uhertasuna % 76,5 txikiagoa izan zen, eta esterilizatzeko iragazkiaren bizitza 7 aldiz baino gehiago luzatu zen. Bai kostuaren bai errendimenduaren ikuspegitik, sakoneko iragazketa hobea da.
Positiboki kargatutako vs. oso positiboki kargatutako sakonera-iragazketa
Esperimentua:Poro-tamaina berdina baina karga-dentsitate desberdina (positibo normala vs. positibo sendoa) duten bi sakonera-iragazki xafla mota probatu ziren FMD fluido inaktibatuetan.
Aurkikuntzak:
Presio eta errendimendu profilak antzekoak ziren.
Sakonera positibo normalairagazki:iragazkiaren uhertasuna 25 NTU.
Sakonera positibo sendoairagazki:iragazkiaren uhertasuna 9,65 NTU (normalaren % 38,6 bakarrik).
Karga-ahalmen handia erretxina-ligando berezietatik dator, eta horiek adsorzio elektrostatikoa hobetzen dute.
Literatur txostenek baieztatzen dute sakonera positiboko iragazki sendoek ostalari-zelulen proteinak (HCP) eta DNA ere ken ditzaketela.
Ondorioa:Sakonera positiboko iragazki sendoek uhertasun murrizketa nabarmen hobea eskaintzen dute (<10 NTU), ultrafiltrazioa/esterilizazio iragazketa babesten dute eta prozesuarekin lotutako ezpurutasun gehigarriak kentzen dituzte.
1. Sakonerazko iragazketa printzipio teknikoak eta abantailak
Gainazaleko iragazketa:Mintzaren gainazalean dauden partikulak bakarrik harrapatzen ditu; batez ere tamainan oinarritutako baheketa.
Sakonerazko iragazketa:Matrize osoko partikulak kentzen ditu harrapaketa eta adsorzio elektrostatikoaren bidez.
Abantaila nagusiak:
Amiantorik gabe (lehen iragazki-euskarriek ez bezala).
Zelulosa-zuntz puruekin, iragazki-laguntzaileekin eta erretxina polimerikoekin egina.
Karga positiboa duten talde funtzionalek partikula finen eta ezpurutasunen adsorzio sendoa ahalbidetzen dute.
Biofarmazia araudiaren eskakizun guztiak betetzen ditu.
2. Eskalagarriak diren iragazketa-eskemak uhertasun-maila desberdinetarako
Ikerketa konparatiboetan oinarrituta:
Baxuauhertasunfluidoak:aurreiragazketa arinagoa nahikoa.
Ertainauhertasunfluidoak:Bi geruzako sakonera-iragazketa gomendatzen da.
Altuauhertasunfluidoak:10 NTU azpitik uhertasuna murrizteko sakonera positiboko iragazketa sendoa behar da, ondorengo prozesamendu eraginkorra eta antigenoen etekin handia bermatuz.
3. Produktuaren inplementazioa: Great Wall iragazketa sakonerako iragazkiak
Great Wall Filtration-ek prozesu biofarmazeutikoetarako diseinatutako sakonera-iragazki sistemak eskaintzen ditu.
Ezaugarri nagusiak:
Zelulak, hondakinak eta solido handiak kentzeko sakonera handiko iragazki-orriak.
Ugaztunen zelula-kulturei, bakterioen/legamien lisatuei aplikagarria.
HCP, DNA, birusak, endotoxinak eta apar-kontrako agenteak kentzeko gai da.
Diseinu trinkoa, linealki eskalagarria, linean edo paraleloan erabiltzeko egokia.
Emari-tasa egonkorrak, zerbitzu-bizitza luzea eta funtzionamendu-kostu baxuak.
Ondorioa
Sakonerazko iragazketa-teknologia sendo eta positiboki kargatuak nabarmen hobetzen ditu argitze-eraginkortasuna eta antigenoen berreskurapena FMD txertoaren ekoizpenean. FMD txertoez gain, beste produktu biologiko batzuetan purifikaziorako bide fidagarria eskaintzen du. Bioprozesuen optimizazioa jarraitzen duen heinean, iragazketa-teknologia aurreratua ezinbestekoa izango da txertoen fabrikazio seguru eta eraginkorrerako.
Artikulu hau erreferentzia gisa soilik oinarritzen da benetako datu esperimentaletan.Balidazioabenetako ekoizpen-baldintzetan gomendatzen da.
